У другому періоді – дослідження провели у КСП ім.Т. Г. Шевченка с. Джурків Коломийського району під час навчальної практики. Для дослідження було відібрано три групи телят по 5 голів у кожній групі віком від 3-7 днів. Перша група контрольна-це здорові телята. Друга група – хворі телята з розладами шлунково-кишкововго тракту. Для лікування телят цієї групи застосовували елктрорефлексотерапію на 3-х точках як у першому досліді і поліфузор внутрішньовенно. Третя група – теж хворі телята з розладами шлунково-кишкового тракту. Для лікування цієї групи використовували електрорефлексотерапію, полі сорбент аеросіл у вигляд суспензії з водою через рот і нормофундин внутрівенно.
У всіх телят дослідних груп вивчали клінічні та гематологічні показники.
Для дослідження крові від піддослідних тварин та стану їх здоров¢я використовували загально прийняті методики. Зокрема: клінічне дослідження-проводили за рекомендаціями кафедри з визначенням загального стану І найважливіших показників організму: температуру, пульс, дихання, артеріальний кров¢яний тиск і венозний кров'яний тиск, габітус, функціональний стан кори головного мозку, та індикація на біологічно активних точках.
Методика визначення загального білку в крові.
Кількість білку в сироватці крові визначали рефрактометричне. При роботі на рефрактометрі РЛУ,спочатку перевіряють нулеву точку, для чого на поверхню вимірювальної призми наносять 1-2 краплі дистильованої води. Лупу шкали і окуляр трубки встановлюють на різкість (в полі зору повинні бути добре видні шкала і візирні лінії),ліквідують диспепсію окуляра зорової трубки поворотом рукоятки» дисперсійного компенсатора, лінію, яка є на лупі шкали,встановлюють на поділці 1,3333, а границю світлотіні суміщають з точкою пересікання візирних ліній за допомогою спеціального ключа.
Після підготовки приладу вказаним способом, розкривають його камеру, протирають верхню і нижню призми фільтрувальним папером, а потім м¢якою салфеткою. На поверхню нижньої призми наносять 1-2 краплі досліджувальної сироватки. Камеру закривають, направляють дзеркалом світле у вікно і повертають камеру до тих пір, поки границя світло-тіні зупиниться на точці пересічення візирних ліній і, на кінець, по шкалі проводять відрахування показника переломлення сироватки.
Користуючись табличними даними, по величині коефіцієнта переміщення сироватки находять вміст білка.
У здорових тварин вміст загального білку сироватки крові становить(г/100мл.):
ВРХ-6,5-7,І Вівці - 6,0 - 7,5
КонІ-6,5-7,8 Свині - 6,5 - 8,5
Собаки-5,9-7,6 Кури - 4,3 - 5,9.
Зменшення концетрацїї загального білку сироватки крові - гіпопротеїнемія зустрічається при низькому рівні білку в раціоні по амінокислотах, при гострих і хронічних кровотечах, гідремії, вагітності, нефроточному набряці, хронічному паренхіматозному гепатиті, цирозі печінки, абсцесах, злоякісних новоутвореннях, паратуберкульозі, термінальнозу туберкульозі, затяжному сепсисі, гарячкових станах, інтосикаціях.
Збільшення концентрації в крові білку гіперпротеїнемія спостерігається при концентрованому типі годівлі ,надлишку перетравного білку, недостатності легкорозчинних вуглеводів, дегідратації, блювоті, тяжких станах діареї, гепатиті, недостатності каротину в кормах, неправильному співвідношенні Са і Р, недостатності вітаміну Д, гострих запаленнях, флегмонах, сепсис і важких інфекціях.
Методика визначення загального кальцію в крові
( по Вичеву, Каракачеву ).
У пробірку беруть 1мл, 0,1 н розчину КОН і декілька крупинок індикаторної суміші, появляється блідорожеве забарвлення. Якщо виникає зеленувата флюоресценсія (внаслідок присутності слідів кальцію) то титрують 0,001 м розчином трилону і до появи блідорвжевого забарвлення. Додають 0,1мл стандартного розчину кальцію, що супроводжується появою флюоресценсії. Титрують 0,001 М розчином трилону і, до появи блідорожевого забарвлення. В пробірку вносять 0,1 мл досліджуваної сироватки крові. Після появи флюоросценціїІ титрують 0,001 М розчином трилону Б до її зникнення. Розрахунок проводять по формулі
Б - кількість 0,001 М розчину трилону і, використаного на титрування робочого стандартного розчину кальцію, а-кількість 0,001 М розчину трилону і, використаного на титрування сироватки крові
А - 0,01-кІлькІсть кальцію, який міститься в 0,1 мл робочого стандартного розчину кальцію, мг.
0,1 - кількість сироватки крові, взятої для визначення, мл.
100 - коефіціент для перерахунку кількості кальцію на 100 мл сироватки крові.
У здорових тварин в сироватці крові вміст загального кальцію становить:
Вид тварин мг/ІООмл Ммоль/л ВРХ 9,5-13,5 2,38-3,38 Коні 10,0-14,0 2,50-3,50 Вівці 9,5-13,5 2,38-3,38 Кози 11,0-13,0 2,75-3,25 Свині 10,0-14,0 2,50-3,50 Собаки 10,0-12,5 2,50-3,43 Зменшення кількості загального кальцію в сироватці крові - гіпокальцемія - спостерігається при голодуванні, рахіті, оштеодистрофі , уремії, після родовому парезі, лейкозах.
Збільшення кількості загального кальцію в сироватці крові може бути при остеодистрофії гіпервітамінозах Д остеомах, гангрені, жовтяниці, перитоніті, серцевій недостатності.
Методика визначення неорганічного фосфору в крові
(по Алемону і Гінсбергу в модифікації Івановського).
Осадження білків. В центрифужну пробірку вносять 3 мл дистильованої води, 1 мл досліджуваної сироватки і 1мл 20% розчину триоцотової кислоти, добре змішують. Через п"ять хвилин центрифугують при 3 тис обертів/хв. протягом 15 хв., або фільтрують черва безвольний фільтр.
Визначення фосфору. В пробірку вносять 2,5 мл центрифугату, 0,5 мл молібденого реактиву і 1мл ІД розчину аскорбінової кислоти і 6 мл дистильованої води. Одночасно ставлять стандартну пробу і контрольну. Через 10 хв. проби фетометрують при зеленому світофільтрі . Розрахунок проводять по формулі :
Х - кількість фосфору в досліджуваній сироватці, мг/100мл,
Ех - екстенція досліджуваної проби,
Ек - екстенція стандарту,
0,05 - кількість фосфору в стандарті,
0,5 - кількість сироватки крові досліджуваній пробі,
100-коефіціент для перерахунку кількості фосфору на 100 мл сироватки . Концетрація неорганічного фосфору сироватки крові здорових тварин слідуюча:
Вид тварин мг/ІООмл Ммоль /л ВРХ 4,5-6,0 1,45-1,94 Вівці 4,5-7,5 1,45-2,48 Кози 6,0-8,0 1,94-2,58 Коні 2,2-5,5 1,36-1,78 Свині 4,0-6,0 1,29-1,94 Собаки 3,0-4,5 0,97-1,45 Кролики 2,5-3,5 0,81-1,13 Кури 3,8-5,6 1,23-1,81. Зменшення концентрації фосфору сироватки крові-гіпофосфатемія - зустрічається при остеодистрофії, рахіті, гіперпаратериозі, неповноцінній годівлі.
Збільшення кенцетрації неорганічного фосфору сироватки кров гіперфосфатемія - спостерігається при гіпервітамінозі Д заживленні переломів кісток, хворобах нирок (нефрити, пієлонефрити), гіпопаратиреозі, жовтій атрофії печінки, лейкозах.